光学显微镜的工作距离是一个重要的参数，它直接影响到显微镜的使用效果和观察质量。以下是对光学显微镜工作距离的详细介绍：
定义
光学显微镜的工作距离也称为物距，是指试样调准焦点时，物镜前缘与试样表面（或物镜使用盖玻片时，与盖玻片顶面）的距离。这个距离是显微镜使用过程中需要特别注意的，因为它决定了物镜与样品之间的接近程度，进而影响观察的清晰度和操作的便捷性。
影响因素
物镜的数值孔径：在物镜数值孔径一定的情况下，工作距离与孔径角成反比。即数值孔径越大，工作距离越短；反之，数值孔径越小，工作距离越长。因此，高倍物镜通常具有较小的工作距离。
物镜的焦距：物镜的焦距越长，其放大倍数越低，相应的工作距离也越长。反之，焦距越短，放大倍数越高，工作距离越短。
实际应用
选择合适的物镜：根据观察需求选择合适的工作距离物镜。如果需要长工作距离进行观察，可以选择长工作距离物镜（如倒置显微镜中常用的长工作距离物镜）。
操作注意事项：在调节显微镜时，要注意保持物镜与样品之间的适当距离，避免物镜与样品接触或碰撞造成损坏。同时，要确保样品表面平整、清洁，以获得Z佳的观察效果。
示例
以常见的物镜为例，10倍物镜的有效工作距离通常为6.5mm左右，而40倍物镜的有效工作距离则缩短至0.48mm左右。这表明随着放大倍数的增加，工作距离显著减小。
总结
光学显微镜的工作距离是显微镜性能的一个重要指标，它受到物镜数值孔径和焦距等因素的影响。在实际应用中，需要根据观察需求选择合适的物镜，并注意保持适当的物距以获得Z佳的观察效果。同时，操作时要小心谨慎，避免物镜与样品之间的碰撞和损坏。
