一、实验目的
了解细胞骨架的结构特征及其制备技术。
二、实验原理
细胞骨架（cytoskeleton）是由蛋白质丝组成的复杂网状结构，根据其组成成分和形态结构可分为微管、微丝和中间纤维。它们对细胞形态的维持，细胞的生长、运动、分裂、分化，物质运输，能量转换，信息传递，基因表达等起到重要作用。当用适当浓度的Triton
X-100处理细胞时，可将细胞质膜中和细胞质中的蛋白质和全部脂质被溶解抽提，但细胞骨架系统的蛋白质不受破坏而被保存，经用戊二醛固定，考马斯亮蓝
R250染色后，可在光学显微镜下观察到由微丝组成的微丝束为网状结构，就是细胞骨架。
三、实验器材、药品
材料：洋葱鳞茎。
器材：普通光学显微镜、滴瓶、容量瓶、试剂瓶、烧杯、载玻片、盖玻片、镊子、小剪刀、吸水纸、擦镜纸。
药品：
（1）M缓冲液（加水定容到1000ml）
| 试剂名称 | 终浓度 | 每升加量 |
| 咪唑 | 50mmol/L | 3.4g |
| 氯化钾 | 50mmol/L | 3.73g |
| 氯化镁 | 0.5mmol/L | 0.1g |
| EGTA | 1mmol/L | 0.38g |
| EDTA | 0.1mmol/L | 0.04g |
| 巯基乙醇 | 1mmol/L | 70ul |
| 甘油 | 4.0mol/L | 294.8ml |
（2）磷酸缓冲液(pH 6.8)：0.2 mol／L 磷酸缓冲液，用NaHCO3调至 pH6.8。
（3）1%Trion X-100：用M缓冲液配制.
（4）0.2％考马斯亮蓝R250：其溶剂为甲醇46.5ml，冰醋酸7ml，蒸馏水46.5ml。
（5）3%戊二醛：用0.2 mol／L磷酸缓冲液配。
四、实验步骤
1.取洋葱鳞茎切成大小约0.5cm2的块状，置磷酸缓冲液内浸泡3－10小时；
2.将浸泡后的鳞茎小块移动到1％的Trion X-100中处理30min；
3.用M-缓冲液洗3次，每次5分钟；
4.放入3％戊二醛中固定30分钟；
5.磷酸缓冲液洗3次，每次2min；
6.考马斯亮蓝染色30分钟；
7.水洗、铺展、装片、镜检。
