荧光显微镜用于研究化学物质在细胞中的吸收、运输、分布和定位。被测物体产生荧光有两种形式：自发光。紫外线照射后直接发出的荧光称为二次荧光。经过荧光染料处理和紫外线照射后，可以发出荧光。细胞中的一些物质，如叶绿素，在紫外线照射后会产生自发光。虽然其他物质本身没有荧光，但它们可以通过荧光染料或荧光抗体染色发出二次荧光。
荧光显微镜选择发光效率高的点光源，发射一定波长的光(紫外线365nm或紫蓝光420nm)作为一种激发光，它会激发标本中的荧光物质，发出各种颜色的半透明光，然后通过物镜和目镜的放大来观察。在如此强烈的对比环境中，即使半透明光很弱，也很容易识别，并且具有很高的灵敏度。它主要用于研究细胞结构、功能和化学成分。
荧光显微镜可分为散射显微镜和下降显微镜两种类型。前者是原始的，后者是先进的。两种荧光显微镜的基本结构相似，主要区别如下：散射激发光通过标本，整个标本产生光，然后进入物镜，放大率越大，光越弱;入射激发光投射到样品表面，样品表面产生光，然后光进入物镜。放大率越大，光线越高，适合高倍数观察。
荧光显微镜的主要部件包括汞灯源、兴奋过滤器、分色镜(脱落)、抑制过滤器、暗场聚光灯(散射)等。此外，由于汞灯的严重加热，其中大多数都配备了吸热过滤器。一些荧光显微镜也有相位差镜和环状阑尾，因此可以观察到相位差。荧光显微镜选择倒置框架、倒置显微镜等。
此外，上述所有显微镜有显微镜CCD组装成数字显微镜，将显微镜看到的物理图像转换成数字图像，并在计算机上显示图像。因此，我们可以通过传统的双眼观察和显示屏上的再现来研究微领域，从而提高工作效率。
在金相显微镜的使用过程中，想要观察到金属破坏的断口就要磨平，抛光并且加化学药水酸洗之后才能看到。
一、过程： 简单地说分为:取样→镶嵌→磨光与抛光→侵蚀→观察照相等五个步骤。
二、注意事项：
a) 金相试片只应在砂轮侧面轻轻地磨制。当试片的厚度小于10mm 时，应在镶嵌后再进行打磨。
b) 严禁在磨片机旋转时更换砂纸、砂布。
c ) 试片打磨，抛光时应拿紧，并力求与磨面接触平稳。两人不得同时在一个旋转盘上操作。
d) 腐蚀、电解金相试片的化学药品试剂应按其性质分类储存和保管，配制、使用时应遵守有关规定；进行电解时，应严格控制电解液的温度及电流密度。
e) 金相腐蚀、电解的操作室应通风良好，并设有自来水和急救酸、碱伤害时中和用的溶液。
f) 金相试验用过的废液应经必要的处理后方可排放，不得将未经处理的废料倒入下水道。
g) 现场进行金相试验时应有防止试剂、溶液泼洒滴落的措施；作业完毕后应将杂物、废液清理干净。
h) 更换卧式金相显微镜的弧光电极时要切断电源。
①在使用光学显微镜时，先留意显微镜总体安装是不是有松脱，例如，光学显微镜长期被使用，将会形成支撑架松脱、物镜安装太松等难题。那样太松会危害检验实践效果，还十分容易破坏光学显微镜。
②运用准焦螺旋的常见问题。在操作过程全过程中十分容易在高倍镜下立刻对焦，或是无论镜筒升高或降低，双眼自始至终在往目镜中看视野，或是不是控制物距的临界点，物距调到２～３公分时还要往上涨，并且旋转准焦螺旋式的速率疾速。这种难题都十分容易形成成物镜摄像镜头恶感到装片，损伤装片或摄像镜头。关于之上实践操作难题，小编想说，在调整镜头焦距时一定要在低倍镜降落，先旋转粗准焦螺旋，使镜筒慢慢地降低，物镜挨近盖玻片，但留意不用让物镜遇到盖玻片，在这个全过程中双眼要从侧边看物镜，随后用右眼朝目镜内注视，并慢慢地反方向调整粗准焦螺旋，使镜筒冉冉上升，直至见到虚像才行，另外向学员标明普通光学显微镜的物距在１公分上下，因而假设物距已远远超越１公分，但并未见到虚像，那可能是标本采集未在视野内或旋转粗准焦螺旋速率过快，这时应调理装片部位，随后再重复所述流程，当视野中出現含糊不清的虚像时，就需求换用细准焦螺旋调整，只能那样，才能够变小找寻范畴，提升寻觅虚像的速率。
③光学显微镜对光线的难题。对光线是应用光学显微镜时很重要的一步，谨记，一定要用低倍镜对光线，当光源较强时用小焦距、平面镜，而光源较差的时分用大光圈镜头、凹面镜，旋转后视镜时不能用一只手就将后视镜扳出来，要用两手旋转，当见到匀称亮堂的环形视野才行。光对好后千万别随意移动光学显微镜，以防光源不能够**地依据后视镜进到通光线的孔子。
④物镜变换的难题。应用低倍镜后改用高倍镜，大家通常喜欢用手指立刻推转物镜，觉得那样较为省劲，但那样十分容易使物镜的光轴产生倾斜，原因是转化器的原资料色泽过软，精细度较高，外螺纹支承不匀称十分容易松动。一旦外螺纹破坏，全部转化器便会报费。因此小编建议大家手握着转化器的下一层旋转板变换物镜。
⑤高倍光学显微镜用眼的难题。用高倍显微镜物镜时，右眼要尽可能接近目镜，右眼尝试向视野内注视，不要用力捂着右眼或果断闭上右眼，它是不符实验的观查规则的，常常那样右眼容易疲倦，另外也不能够保证边观查边绘图。
视频显微镜的聚光器也叫集光器，由聚光镜和可变光阑组成。聚光镜由一片或数片透镜组成，其作用相当于凸透镜，起聚光的作用，以增强射入物镜的光线。可变光阑也叫光圈，位于聚光镜的下方，由十几片金属薄片组成，中心部呈圆孔。推动可变光阑的把手可以任意调节孔径的大小，其作用是通过调节光强度，使聚光镜的数值孔径和物镜的数值孔径相一致。可变光阑开得越大，则数值孔径越大；反之，则数值孔径越小。
视频显微镜的反光镜一般装在聚光器下方的镜座上，可以在水平和直方向任意旋转。它的一面是平面镜，另一面是凹面镜，其作用是使光源发出的光或自然光射向聚光镜。光强时用平面镜，光弱时用凹面镜。有的显微镜的人工光源安装在镜座内，其反光镜也固定在镜座内。
由单透镜构成的放大镜和由透镜组成的实体显微镜(解剖镜)称单式显微镜生物学教学及科研所用的光学显微镜一般是复式显微镜。
由外界入射的光线经反光镜反射向上，或由内光源发射的光线经集光镜向上，再经聚光镜会聚在被检标本上，使标本得到足够的照明，由标本反射或折射出的光线经物镜进入使光轴与水平面倾斜45
度角的棱镜，在目镜的焦平面上，即在目镜的视场光阑处，成放大的侧光实像，该实像再经目镜的接目透镜放大成虚像，所以人们看到的是虚像。
被检物体经显微镜的物镜和目镜放大后的总放大倍数是物镜的放大倍数和目镜放大倍数的乘积。如用放大40倍的物镜和放大10倍的目镜的总放大倍数是400倍。
当视频显微镜放大倍数增加时，一方面由于放大倍数越高，透镜数目越多，被透镜吸收的光线也越多;另一方面由于视场(指的是所能看到被检标本的范围)的亮度与放大倍数的平方成反比，即放大倍数越高，视场越暗。为了得到足够的亮度，必须安装聚光器，把光线集中到所要观察的标本上。
观察时视频显微镜的聚光器该处的高度
观察时，要保证得到*好的观察效果，聚光器的聚光焦点应正好落在标本上。要实现这个条件，就必须调节聚光器的高度。当用平行光照明时，聚光器的聚光焦点是在它上端透镜平面中心上方约1.25mm之处，因此，人们常常要求在观察时将聚光器上升到它上端透镜平面仅稍稍低于载物台平面的高度，这样聚光焦点就可能落到位于标准厚度载玻片上的标本上。当使用比标准厚度薄的载玻片来承放标本时，聚光器的位置要相应地降低一些，而当使用过厚地载玻片时，聚光焦点只能落在标本下方，不利于精细的观察。
视频显微镜的聚光器应与物镜配合使用
这里所谓的配合，指的就是使视频显微镜的聚光器和物镜这两者的数值孔径取得一致，以更好的进行较为精细的观察。假如聚光器的数值孔径低于物镜，那物镜的部分数值孔径就浪费了，从而达不到它的*高分辨率。假如把聚光器的数值孔径大于物镜的数值孔径，则一方面不能提高物镜的规定分辨力，另一方面反会由于照明光束过宽，使物象的清晰度下降。聚光器与物镜配合的操作方法是：在完成照明、调焦操作后，取下目镜直接向镜筒中看，把聚光器下的可变光阑关到*小，再慢慢地开大。开到它的口径与所见视场的直径恰好一样大，然后按上目镜，即可进行观察。每转换一次物镜，都要随着进行依次这样的配合操作。有的聚光器可变光阑的边框上刻有表示开启口径的尺度，可以根据刻度来进行配合。
在显微镜光源故障维修中，发现其中有一部分用户(约25%)因对显微镜光源系统缺乏了解，把本可以自己解决光源故障的显微镜，从很远的地方送来或寄到单位维修。不仅费时，而且费力、费钱。为了让这部分显微镜使用用户，不再跑冤枉路、花冤枉钱，先向大家介绍一下遇到显微镜光源故障时的维修方法：
1、检查灯泡是否烧坏。约10%的用户因有些灯丝烧坏肉眼很难辨别而把显微镜拿来厂家修理。
2、检查保险丝是否烧坏。约5%的用户因有些保险丝烧断后很难用肉眼判别而退到修理。正确检查方法是用万用表电阻档检测保险丝是否良好
3、检查显微镜灯泡插座是否因温度高表面氧化而造成接触不良。约7%的用户因灯泡插座表面氧化而把显微镜拿来修理，正确的检查方法是取下灯泡，用细沙纸或者小刀片打磨刮去灯座表面的氧化层，然后装回灯泡检查灯座是否接触良好。
4、检查电源插座接触是否良好。约3%的用户把光源没有问题的显微镜拿来厂家维修，结果在插上电源，显微镜光源正常。
在使用显微镜时首先应该考虑的是你需要观察什么内容，希望得到什么观察/拍摄效果，然后才能决定采用什么类型的显微镜。如果想达到*理想的明视野显微镜的效果指显微镜应达到的*佳分辨率)而显微镜上用的却是消色差或相差物镜，或所使用的聚光器的数值孔径只有1.2(阿贝聚光器)那么无论怎样努力，也不可能拍出*好的照片(指用油镜工作时)。
所以，拍摄前应检查确定所使用的显微镜类型及组件是否匹配，调整方法是否正确，这是至关重要的，一般来讲，确定所使用的显微镜方法是否正确，应先看物镜的类型，再查聚光器用的是否正确，然后再核实是否符合柯勒照明条件。
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